Интраназальное введение моноклональных антител подавляет аллергическую реакцию на полынь у мышей
Аллерген-специфическая иммунотерапия (АСИТ) — эффективный метод лечения аллергического ринита. При АСИТ вырабатываются антитела IgG, блокирующие связывание аллергена с IgE и тем самым предотвращающие активацию эффекторных клеток и аллергическую реакцию.
В новом исследовании международный коллектив ученых представил первые in vivo доказательства эффективности интраназальной терапии моноклональными антителами (mAb) против полыни обыкновенной (Artemisia vulgaris) — важного аэрoаллергена.
Мышам вводили экстракт пыльцы полыни, с тремя бустерами через каждые 2 недели. Через 3 суток после последнего бустера извлекали селезёнки, сливали спленоциты с клетками миеломы SP2/0 и получали гибридомы. Клоны, продуцирующие IgG₁, отбирали по прямому ELISA на пластинах с покрытием из экстракта пыльцы или рекомбинантного Art v 1. Два клона продемонстрировали высокую аффинность к натуральному экстракту пыльцы и к рекомбинантной молекуле аллергена полыни Art v 1. Важным критерием также являлась способность блокировать IgE. В результате тестов был выбран клон XA19, соответствующий всем требованиям.
Мышей успешно сенсибилизировали к пыльце полыни, что подтверждалось увеличением уровней общих и специфических IgE и выраженной реакцией в тесте отека уха. Экспериментальным мышам вводили моноклональное антитело интаназально, контрольным — нет. Еще одну контрольную группу не сенсибилизировали к полыни. После контакта с аллергеном в первой контрольной группе уровни IgE значительно возрастали, тогда как у мышей, получивших mAb, этот рост был слабее. Также в этой группе уменьшился отек уха как по сравнению с моментом сенсибилизации, так и в сравнении с контрольной группой. Это свидетельствует о снижении местной аллергической реакции, несмотря на относительно стабильный уровень IgE.
У мышей, предварительно получивших mAb, наблюдалось значительное снижение симптомов ринита, включая уменьшение частоты потирания носа, и почти полное отсутствие гистологических изменений слизистой. В контрольной группе регистрировались выраженные воспалительные и деструктивные изменения. Также у получивших антитела мышей почти полностью исчезла гиперреактивность дыхательных путей, сравнимая с уровнем во второй контрольной группе.
После контакта с аллергеном у мышей контрольной группы резко увеличивалась экспрессия Th2-ассоциированных интерлейкинов 4 и 5 (IL-4 и IL-5) в легочной ткани. Предварительная обработка mAb значительно снижала уровень этих цитокинов.
С помощью специальной программы (AlphaFold) была предсказана структура молекулы аллергена полыни Art v 1 и антигенсвязывающего фрагмента mAb XA19. Моделирование показало, что XA19 связывается с областью белка, обладающей дефензинподобной структурой, которая также распознается IgE у людей с аллергией. Такое связывание может препятствовать взаимодействию IgE с аллергеном за счет пространственного перекрытия или индукции конформационных изменений Art v 1.
Таким образом, интраназальное введение моноклональных антител против аллергена (полыни) эффективно подавляет местные воспалительные реакции и симптомы аллергического ринита и астмы. Это показывает перспективность локальной терапии антителами как альтернативы традиционной АСИТ.