Новый подход к лечению гриппа: препараты воздействуют на нуклеолин клеток хозяина.
Новый подход к лечению гриппа: препараты воздействуют на нуклеолин клеток хозяина.
Вирусы гриппа A и B (IAV и IBV) ежегодно уносят жизни 290 000-650 000 человек, а IAV уже становились причиной пандемий. Вирусы быстро мутируют, что приводит к появлению новых штаммов, в том числе устойчивых к ранее эффективным препаратам - блокатору M2-каналов амантадину и ингибитору нейраминидазы осельтамивиру. Исследователи из Южной Кореи предложили новый подход: воздействовать не непосредственно на вирус, а на организм хозяина.
Фосфопротеин нуклеолин (NCL) присутствует в ядрышке, нуклеоплазме, цитоплазме и на клеточной мембране и участвует в различных клеточных процессах. При этом многие вирусы используют NCL для завершения собственного цикла репликации. Ранее исследователи разработали связывающий NCL пептид AGM-330 для диагностики и лечения рака. В новой работе к нему присоединили проникающий в клетку пептид (CPP), получив AGM-330d (димер) и AGM-330t (тетрамер), и показали их способность подавлять IAV и IBV.
При заражении клеток A549 (лабораторная клеточная линия, происходящая из эпителиальных клеток лёгкого человека) различными штаммами IAV и IBV уровень NCL повышался и оставался высоким в течение 12-18 часов, после чего снижался, несмотря на продолжающуюся репликацию вируса. NCL локализовался в тех же областях клетки, что и вирусный нуклеопротеин, и взаимодействовал с ним. Нокдаун NCL препятствовал выходу вирусного нуклеопротеина из ядра в цитоплазму, что подавляло репликацию вируса.
AGM-330d и AGM-330t также блокировали транспорт вирусного нуклеопротеина из ядра в цитоплазму. Это приводило к снижению синтеза вирусных белков, репликации вирусного генома и вирусных титров. Пептиды были эффективны и против штаммов, устойчивых к обычным противовирусным препаратам. При испытании на других РНК-вирусах они также подавляли репликацию, хотя эффективность различалась.
При введении мышам максимальных доз AGM-330d и AGM-330t признаков токсичности, включая потерю массы тела и патологические изменения органов, не выявили. Затем животных заражали адаптированным вирусом гриппа A и лечили пептидами в различных дозировках. Без лечения все мыши погибали в течение 10 дней. На фоне терапии выживаемость увеличивалась с повышением дозы и достигала 60% при введении AGM-330d в дозе 2 мг/кг в сутки и 65% при введении AGM-330t в дозе 1-2 мг/кг в сутки. Лечение также снижало тяжесть поражения легких и подавляло вирусную репликацию.
Комбинация пептидов с осельтамивиром показала более выраженный эффект. Выживаемость составила 40% при применении только осельтамивира, 60% для AGM-330d и 65% для AGM-330t, тогда как комбинация AGM-330d с осельтамивиром повышала выживаемость до 90%, а AGM-330t с осельтамивиром - до 100%.
По мнению авторов, препараты, связывающиеся с нуклеолином, могут стать перспективным направлением для преодоления лекарственной устойчивости и лечения гриппа.