Вирус бешенства заражает кератиноциты
В большинстве случаев бешенство передается человеку через укусы собак. Однако с ростом вакцинации собак всё большее значение приобретают летучие мыши. Их укусы и царапины обычно не достигают мышц — вирус попадает в эпидермис и дерму. Заражение возможно и через попадание слюны в микротравмы кожи. Как вирус достигает нервной системы оставалось недостаточно изучено.
Нидерландские исследователи ранее показали присутствие вируса бешенства в кератиноцитах у животных. В новой работе они проверили это in vitro на клеточной линии кератиноцитов человека (HaCaT) и первичных эпидермальных кератиноцитах (HPEK - клетки, которые были выделены непосредственно из свежего образца кожи человека). Анализировали тропизм следующих штаммов вируса бешенства — от серебристого гладконоса (SHBRV), от собаки (dogRV) и аттенуированный вакцинный штамм SAD P5/88 Potsdam (SAD P5).
Все три штамма заражали HaCaT и HPEK. Через 72 часа в HaCaT инфицированность SHBRV или SAD P5 достигала 5-10%, dogRV - менее 0,02%. В HPEK dogRV заразил 8% клеток, SHBRV - 30%, SAD P5 - 20%. Один донор показал низкую восприимчивость. Обе линии экспрессировали рецепторы (nAChRa7, NCAM, p75NTR, mGluR2, ITGB1), потенциально участвующие в проникновении вируса. SHBRV и SAD P5 продуцировали вирусные частицы. Как и ожидалось, все штаммы эффективно заражали клетки нейробластомы SH-SY5Y.
Чтобы выявить активацию кератиноцитов в ответ на вирус бешенства, авторы измерили уровни экспрессии ICAM-1, PD-L1, HLA-ABC и HLA-DR.
Измеряли концентрации 13 цитокинов через 72 часа после заражения клеток. HaCaT почти не вырабатывали цитокины в ответ на заражение. Но все же уровни IFN-α2 и IP-10 значительно возрастали при воздействии SAD P5, а уровень IFN-λ1 - при воздействии SAD P5 и SHBRV. В ответ на SHBRV и SAD P5 у HPEK активировалась секреция IFN-α2, IFN-λ1, IP-10, IL-8, IL-6 и GM-CSF.
Но могут ли кератиноциты передавать вирус дальше? На коже зараженных мышей было показано, что нервы присутствуют в эпидермисе и иногда колокализуются с зараженными кератиноцитами. При совместном культивировании HaCaT и нервных клеток было показано, что вирус бешенства передается от зараженных кератиноцитов к нервным клеткам.
Таким образом, кератиноциты могут быть заражены вирусом бешенства и обладают штаммоспецифичной чувствительностью. Возможно, это связано с происхождением штаммов: dogRV адаптирован к глубоким укусам, SHBRV - к поверхностным ранам. Кератиноциты способны передавать вирус нейронам, что делает поверхностные повреждения от зараженных животных потенциально опасными.