Моноклональные антитела против ВЭБ: доклинические данные
Вирус Эпштейна–Барр (ВЭБ) — онкогенный вирус, ассоциированный примерно с 358 000 новых случаев рака и 209 000 смертей ежегодно. Большинство ВЭБ-ассоциированных опухолей происходят из эпителиальных клеток и В-лимфоцитов — основных мишеней первичного инфицирования, репликации и латентного периода вируса. Особую угрозу ВЭБ представляет для пациентов с иммунодефицитами.
Исследователи из США создали моноклональные антитела, которые препятствуют заражению ВЭБ.
Для проникновения в клетки вирус использует гликопротеины gH, gL и gB. Инфицирование В-клеток начинается с взаимодействия вирусного белка gp350 (или его сплайс-варианта gp220) с рецепторами комплемента CD21 и/или CD35. Вирусный белок gp42 формирует комплекс с gH/gL; его связывание с HLA класса II запускает gB-опосредованное слияние мембран.
Нейтрализующие антитела против gH/gL, gB, gp350 и gp42 при профилактическом введении гуманизированным мышам в разной степени предотвращали виремию, спленомегалию, ВЭБ-индуцированную лимфому и летальный исход. Аналогичные антитела к gp350 и gH/gL защищали макак-резусов от заражения вирусным ортологом ВЭБ (лимфокриптовирусом макак-резусов).
В работе использовали мышей ATX-GK (Alloy Therapeutics), продуцирующих полностью человеческие антитела. После иммунизации рекомбинантными gp350 и gp42 были получены два антитела к gp350 (ATX-350) и восемь — к gp42 (ATX-42).
ATX-350 блокировали заражение Raji B-клеток (лабораторная клеточная линия В-лимфоцитов человека), при этом ATX-350-2 демонстрировал более высокую нейтрализующую активность, чем ATX-350-1. Оба антитела конкурировали за связывание gp350 и перекрывали участок взаимодействия с CD21, однако ATX-350-2 делал это эффективнее.
Также было проведено исследование in vivo на гуманизированных мышах. Следует отметить, что эпителиальные клетки этих мышей не подвержены заражению ВЭБ. ATX-42-2, ATX-350-2 и контрольные антитела вводили внутрибрюшинно, затем заражали мышей вирусом. ATX-42-2 предотвратил спленомегалию у всех особей. Все мыши выжили в течение 74 дней после заражения, однако на этом этапе одна мышь достигла критериев эвтаназии. У одной мыши на восьмой неделе наблюдалась проходящая виремия. В спленоцитах всех мышей группы ATX-42-2 отсутствовала обнаруживаемая вирусная ДНК.
Две из четырех мышей, получивших ATX-350-2, дожили до 74-го дня, и все имели нормальный вес селезенки на момент эвтаназии. Хотя ни у одной из мышей в группе ATX-350-2 не было виремии, вирусная ДНК была обнаружена в селезенке у двух из четырех мышей в этой группе.
Авторы измеряли уровни моноклональных антител в сыворотке крови в течение трех недель. Через сутки после введения моноклональных антител уровни ATX-42-2 в сыворотке крови были выше, чем уровни ATX-350-2. ATX-350-2 распадались быстрее, чем ATX-42-2, в течение первых двух недель. Благоприятные фармакокинетические профили ATX-42-2, возможно, способствовали более эффективной защите, обеспечиваемой этими моноклональными антителами по сравнению с ATX-350-2.