Липофильные миРНК обеспечили эффективную доставку и подавление JAK1 в коже in vivo
Терапию на основе малых интерферирующих РНК (миРНК) уже несколько лет применяют в клинике. Однако пока хорошо отработана только доставка миРНК в печень. Ведутся работы по доставке и в другие органы, такие как мышцы, легкие, центральная нервная система. Исследователи из США и Канады представили данные по оптимизации доставки миРНК в клетки кожи.
Заболевания кожи широко распространены (от них страдает до трети населения мира). Доставка терапевтических препаратов в кожу без системной иммуносупрессии - важная и сложная задача. Очевидное решение - доставлять миРНК не системно, а локально.
Ранее авторы показали, что химическая модификация миРНК липофильными группами повышает их эффективность. В новой работе они изучили фармакокинетику и фармакодинамику липофильных миРНК в коже свиньи in vivo и коже человека ex vivo.
К миРНК присоединяли докозановую кислоту (DCA-миРНК) или дендример (D-миРНК) и сравнивали их с немодифицированной формой (Unc-миРНК). Различные миРНК вводили в образцы кожи человека, отобранные при биопсии. Все протестированные миРНК проникли в основные клетки кожи, но DCA-миРНК делали это наиболее активно, особенно в меланоциты и иммунные клетки. Для примера использовали миРНК, таргетирующие JAK1. Все миРНК снижали уровень мРНК JAK1, но DCA-миРНК - сильнее всего (на 50% в эпидерме и на 75% в дерме). D-миРНК и Unc-миРНК снижали количество мРНК на 25% в эпидермисе и на 50% в дерме.
JAK1 является компонентом сигнального каскада IFN-γ. На образцы кожи воздействовали миРНК в течение четырех дней, а затем стимулировали IFN-γ в течение 24 часов для того, чтобы вызвать экспрессию хемокинов. Затем оценивали экспрессию хемокинов: CXCL9, CXCL10 и CXCL11. Все миРНК подавляли экспрессию мРНК хемокинов, но сильнее всего - DCA-миРНК (снижение на 70%), за ним - D-миРНК и Unc-миРНК (примерно на 50%).
В модели на свиньях, чья кожа структурно близка к человеческой, DCA- и D-миРНК сохранялись в коже не менее восьми недель, при этом их концентрация в сердце, печени, селезенке и почках была в 15–20 раз ниже. В течение недели после введения не отмечено изменений уровней 17 цитокинов, числа тромбоцитов и лейкоцитов, показателей функции печени (АЛТ) и почек (карбамид). Системное введение не обеспечивало детектируемого накопления миРНК в коже.
При внутрикожном введении DCA-миРНК с последующей стимуляцией IFN-γ через месяц сохранялось снижение экспрессии JAK1 (≈50% в эпидермисе и 75% в дерме) и хемокинов: CXCL9 - на ra_50% в обоих слоях, CXCL10 - на 50% в эпидермисе и 40% в дерме, CXCL11 - преимущественно в дерме (ra_50%).
Таким образом, DCA-конъюгированные миРНК обеспечивают выраженное и стойкое подавление целевых генов в коже ex vivo и in vivo при минимальном системном воздействии. Препарат DCA-миРНК, таргетирующий JAK1, в настоящее время проходит клиническое исследование фазы 2a.
Источник: https://pcr.news/novosti/lipofilnye-mirnk-pri-mestnom-vvedenii-nadolgo-zaderzhivayutsya-v-kozhe/