Активация и экспансия NK-клеток снижает пул ВИЧ-инфицированных клеток in vitro
Антиретровирусная терапия позволяет снижать вирусную нагрузку ВИЧ до необнаружимых уровней, однако вирус сохраняется в латентных резервуарах и способен быстро возвращаться после отмены лечения, поэтому поиск стратегий, направленных на элиминацию инфицированных клеток, остается актуальным. Исследователи из США представили лабораторную (in vitro) работу, в которой попытались усилить «kill»-компонент стратегии «shock and kill» за счет активации и экспансии NK-клеток.
В норме NK-клетки периферической крови (CD3⁻CD56⁺) примерно на 90% представлены CD56^dim и на 10% - CD56^bright: первые обладают выраженной цитотоксичностью, вторые -преимущественно иммунорегуляторной функцией, но под действием цитокинов также могут становиться цитотоксичными. Их активность определяется балансом сигналов от активирующих и ингибирующих рецепторов, и экспрессии белков ВИЧ-1 на клетке-мишени достаточно для запуска цитолиза. При ВИЧ-инфекции описано накопление дисфункциональных CD56⁻ NK-клеток и сокращение цитотоксического пула.
NK-клетки из мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) исходно малoцитотоксичны, но активируются in vitro IL-2, IL-15 и их производными. Авторы использовали искусственные антигенпрезентирующие клетки (aAPC), экспрессирующие связанный с мембраной IL-21 (mbIL21), для увеличения популяции и активации NK-клеток из PBMC людей, живущих с ВИЧ, или ВИЧ-отрицательных доноров. За 3-4 недели их число увеличивалось в 150-500 раз. Фенотип смещался к CD56^brightCD16⁺ вне зависимости от ВИЧ-статуса донора. После экспансии возрастала экспрессия активирующих рецепторов при сохранении ингибирующих, а РНК-секвенирование показало усиление цитотоксического профиля (гранзим B, перфорин, FasL, TRAIL, IFNγ, TNFα). В функциональных тестах лизис клеток-мишеней возрастал с 20% для первичных NK до 80% после экспансии.
Далее модель воспроизводили ex vivo: CD4⁺ T-клетки памяти инфицировали ВИЧ и реактивировали вирус, после чего культивировали с экспансированными NK. Эти клетки преимущественно элиминировали инфицированные мишени; в образцах от трех доноров реактивация увеличивала выход вирионов, но в присутствии NK он снижался, у одного донора - почти до неопределяемого уровня. Доля клеток в которых обнаруживается РНК гена env ВИЧ уменьшалась на 56%, 67% и 63% через 3, 5 и 7 дней соответственно; сопоставимая динамика наблюдалась у 9 из 10 доноров.
Работа подчеркивает принципиальную возможность усилить элиминацию реактивированных ВИЧ-инфицированных клеток с помощью ex vivo-активированных NK, однако речь пока идет только о клеточных моделях. Авторы отмечают потенциал использования NK, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, и указывают, что для клинически значимой эрадикации потребуется воздействие на тканевые резервуары в лимфатических узлах, кишечнике и ЦНС. Пока это экспериментальная стратегия, требующая проверки in vivo и в клинических исследованиях.
Источник: https://journals.asm.org/doi/10.1128/mbio.02956-25