Топическая CRISPR-терапия при аутосомно-рецессивном врожденном ихтиозе: доклинические результаты
Для терапии генетических заболеваний можно внедрять в клетки не только функциональные гены, но также инструменты для редактирования генов, такие как CRISPR. Команда из Университета Британской Колумбии совместно с исследователями из Берлинского института здоровья при клинике Шарите в Германии впервые разработала CRISPR-терапию для местного применения, специально для лечения кожных заболеваний. Статья опубликована в журнале Cell Stem Cell.
В данном случае терапия исправляет наиболее распространенную мутацию, вызывающую аутосомно-рецессивный врожденный ихтиоз (АРВИ). Это группа заболеваний связана с мутациями в 11 генах. Тяжелые и умеренной тяжести формы АРВИ встречаются с частотой около 1–7:100 000. Большинство случаев АРВИ обусловлены мутациями в гене трансглутаминазы-1 (TGM1). Синтезируемая кератиноцитами, TGM1 участвует в формировании ороговевшей оболочки клеток. Нарушение ее функции приводит к дефектам липидных слоев и снижению барьерной функции кожи.
В работе корректировали мутацию TGM1 c.877-2A>G в сайте сплайсинга, ответственную примерно за 34% случаев АРВИ. Использовали редактор оснований с заменой C→T, что функционально приводило к обратной замене G→A. Несмотря на сложность из-за соседних нуклеотидов, была достигнута приемлемая эффективность.
мРНК редактора и направляющую РНК доставляли липидными наночастицами (ЛНЧ). В in vitro-моделях кожи из кератиноцитов пациентов удалось восстановить до 12% сайтов-мишеней и до 30% активности фермента - уровень, потенциально клинически значимый. Для проникновения ЛНЧ к стволовым клеткам кожи использовали лазерное микроперфорирование рогового слоя.
Редактор показал высокую специфичность. В экспериментах на мышах даже при повторном введении профиль безопасности оставался благоприятным. По словам руководителя работы Сары Хедтрих, устранение первопричины может обеспечить длительный эффект после однократного лечения.
Авторы работы рассчитывают вскоре начать клинические испытания метода. По их мнению, эта стратегия лечения может быть адаптирована и к другим заболеваниям кожи, включая буллезный эпидермолиз и, возможно, к более распространенным заболеваниям, таким как экзема или псориаз.
Источник: https://www.eurekalert.org/news-releases/1114280